Layton recebe uma carta da famosa cantora de ópera Jenis Quatlane, convidando-os para ver sua mais nova apresentação. Ela também pede ajuda a Layton, Luke e Remi em um mistério, dizendo que sua amiga Melina morreu há um ano, mas voltou mais tarde como uma menina de sete anos dizendo que havia encontrado o segredo da vida eterna, e que também conhecia todos os segredos que só a verdadeira Melina poderia saber. Naturalmente, o caso fascina Layton e seu aprendiz, então eles vão para a ópera Crown Petone, mas Remi fica em Londres, em busca de algumas garotas que desapareceram lá. A ópera era sobre um reino perdido, O Reino dos Imortais; era uma vez uma linda rainha que adorava música. Ela era amada por todos no reino. Mas um dia a rainha ficou muito doente. O povo do reino trabalhou duro para encontrar uma cura, mas a medicina não conseguiu ajudar. A rainha finalmente faleceu e logo em seguida a cura foi concluída: uma poção para a imortalidade. O povo do reino lamentou profundamente a morte de sua rainha. Para reencontrar a rainha reencarnada, eles decidiram se tornar imortais, usando a panaceia da imortalidade recém-concluída. O Reino de Abrosia ainda está em algum lugar deste mundo, esperando o retorno de sua rainha, e então ela cantará para sempre. Terminado o espetáculo, um mascarado aparece e propõe algo ao público: "Vamos jogar" - diz ele - "O vencedor terá a vida eterna. Os perdedores terão que morrer." Cabe a Layton e Luke entrar no jogo e descobrir o segredo da Vida Eterna. Acontece entre os eventos dos videogames Professor Layton and the Last Spectre e Professor Layton and the Miracle Mask. (Fonte: Wikipédia)
Luke é um menino que admira o Professor Layton e deseja também se tornar um grande solucionador de quebra-cabeças. Ele mora na Inglaterra e embora seja apenas substituto do Professor, é cuidado por ele como um filho.
Uma conhecida cantora de ópera que procurou a ajuda do Professor Layton para resolver mistérios envolvendo sua amiga Melina, que havia desaparecido há um ano, mas voltou recentemente com o aparecimento de uma criança de sete anos que também afirma ter descoberto o segredo da vida…
Arqueólogo com talento extremo e gosto por quebra-cabeças, o Professor Layton é extremamente bom em resolver mistérios, embora não seja um detetive (já que muitas vezes corrige as pessoas). Ele aceita Luke como substituto, embora se importe bastante com o menino. O professor valo…
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